Effects of Acetone Fraction From Buchenavia tomentosa Aqueous Extract and Gallic Acid on Candida albicans Biofilms and Virulence Factors.

A promising anti-Candida activity of Buchenavia tomentosa extracts was recently described. In the present work, experiments were carried out to determine the fraction with higher antifungal activity from a B. tomentosa extract. Acetone fraction (AF) was obtained from the aqueous extract from dried leaves (5 min/100°C) and it was the most effective one. Gallic acid (GA) was identified by electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) and also chosen to perform antifungal tests due to its promising activity on Candida albicans. Minimal inhibitory and fungicidal concentrations (MIC and MFC) were determined by broth microdilution technique. The effect on virulence factors of C. albicans was evaluated, and the cytotoxicity was determined. MIC50 and MIC90 values were both equal to 0.625 mg ml-1 for AF and 2.5 and 5 mg ml-1, respectively, for GA. AF and GA showed ability to inhibit C. albicans adherence and to disrupt 48 h-biofilm. AF and GA were effective in reducing the formation of hyphae of C. albicans SC5314. AF and GA decreased adherence of C. albicans to oral epithelial cells. AF and GA showed slight to moderate toxicity to Vero cells. This result suggests further studies for topic use of these compounds. AF, which contains a combination of several molecules, presented greater potential of antimicrobial activity than GA, with lower values of MIC and lower cytoxicity.

Terapias alternativas para o tratamento da estomatite por prótese total: modelo experimental in vivo em ratos / Alternative therapies for denture stomatitis treatment: in vivo experimental model in rats

A estomatite por prótese (EP) é uma condição multifatorial que acomete frequentemente usuários de prótese total e geralmente é relacionada com Candida albicans. Devido aos efeitos tóxicos da terapia antifúngica, novas terapias para EP são necessárias. Objetivos: O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do extrato aquoso de Buchenavia tomentosa e bicarbonato de sódio frente a C. albicans em um modelo de EP em ratos. Material e Métodos: Um aparelho de resina acrílica simulando a base da prótese total foi fixado cobrindo o palato de 48 ratos machos seguido por indução da candidose. Os ratos foram divididos em 4 grupos (n=12): controle, bicarbonato de sódio, B. tomentosa e nistatina (controle positivo). Cada grupo foi subdividido de acordo com o período de tratamento; 24 horas (n=6) e 48 horas (n=6). Os animais foram sacrificados e os aparelhos foram removidos para contagem de C. albicans e análise por microscopia eletrônica de varredura. Resultados: Após 24 horas de tratamento, observou-se redução significativa da contagem de C. albicans tanto B. tomentosa quanto nistatina (nistatina x controle, p<0,01; B. tomentosa x controle, p=0,03). Os resultados foram confirmados pela análise histológica. Conclusão: Tanto o extrato aquoso de B. tomentosa e o bicarbonato de sódio foram capazes de reduzir significativamente as contagens de C. albicans em modelo experimental de EP (AU)

Background: Denture stomatitis (DS) is a multifactorial condition that commonly affects denture users and is mainly caused by Candida albicans. Due to the toxic effects of antifungal therapy, new therapies for DS are claimed. Objective: The aim of the study was to evaluate the efficacy of aqueous extract of Buchenavia tomentosa and sodium bicarbonate against C. albicans in a model of DS in rats. Material and Methods: An acrylic resin device simulating a denture base was fixed covering the palate of forty-eight male rats followed by candidiasis induction. Rats were divided into 4 groups (n = 12): Control, sodium bicarbonate, B. tomentosa and nystatin (positive control). Each group was subdivided according to the period of treatment; 24 h (n = 6) and 48 h (n = 6). Animals were sacrificed and had their devices removed for C. albicans counts and SEM analysis. The palate mucosa was removed and processed for histopathologic analysis. Results: After 24 h of treatment, both B. tomentosa and nystatin groups reduced significantly C. albicans counts when compared to control (nystatin x control, p < 0.01; B. tomentosa x control, p = 0.03). The results were confirmed by the histologic analysis. Conclusion: Both the aqueous extract of B. tomentosa and sodium bicarbonate was able to significantly decrease C. albicans counts in an experimental model of DS (AU)

Atividade da fração enriquecida em fenólicos de Buchenavia tomentosa e de algumas substâncias isoladas antes e após encapsulação com beta-ciclodextrina em Candida albicans / Activity of phenolic enriched fraction of Buchenavia tomentosa and some isolated compounds before and after encapsulation with beta-cyclodextrin in Candida albicans

O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade frente a Candida albicans da fração enriquecida em fenólicos (FE) das folhas de Buchenavia tomentosa além das substâncias ácido gálico (AG), corilagina, kaempferol e vitexina, substâncias fenólicas que foram previamente detectadas no extrato aquoso de B. tomentosa livres ou encapsuladas em ciclodextrinas. Para tal, foi realizado teste de micro diluição com cepas padrão e isolados clínicos e análise química da FE por espectrometria de massa (ESI-MS).Detectou-se que o extrato acetônico foi a FE e AG foi a substância fenólica mais eficiente contra C. albicans. O efeito de FE e AG contra os fatores de virulência de C. albicans foram analisados. FE e AG foram encapsulados em 2-hidroxipropil-beta-ciclodextrina e tiveram sua análise química realizada. As CIMs e CFMs dos encapsulados foram determinadas, porém apenas o AG encapsulado teve sua ação antibiofilme e in vivo verificadas. A citotoxicidade de AG e FE livres e encapsulados foi determinada. As CIMs variaram de 5,0 e 0,625 mg/mlpara o ácido gálico e 2,5 e 0,019 mg/ml para FE. AG e as outras moléculas foram encontradas na FE. Não foram encontrados CFMs. Os fenólicos estudados também foram encontrados em FE por ESI/MS. Tanto FE quanto AG tiveram efeito direto nos fatores de virulência de C. albicans, exceto sobre a secreção de exoenzimas. Não houve diferença na CIM entre as substâncias livres e encapsuladas. AG encapsulado teve melhor ação anti-biofilme do sua forma livre. Foi verificada melhora clínica de lesões eritematosas no palato de ratos, porém não foi possível. A citotoxicidade das substâncias livres ou encapsuladas variou de moderava a leve para FE e foi moderada para AG. Após as análises, observou-se o efeito anti-C. albicans de FE e AG. AG encapsulado apresentou promissor efeito anti-biofilme e aparente melhora clínica nas lesões sugestivas de candidose eritematosa na mucosa palatar dos ratos

The aim of this study was to evaluate the effectiveness against Candida albicans of fraction enriched in phenolic (FE) of Buchenavia leavestomentosa beyond substances gallic acid (GA), corilagin, kaempferol andvitexin, phenolic substances previously detected in the aqueous extract ofB. tomentosa, free or encapsulated in cyclodextrins. Microdilution test with standard strains and clinical isolates besides the chemical analysis of FEby mass spectrometry (ESI-MS) were carried out. The acetone extract was the FE and AG was the most efficient phenolic substance against C.albicans. The effect of FE and AG against the virulence factors of C.albicans was also analyzed. FE and AG were encapsulated into 2-hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HP-β-CD) and had their chemical analyses made. MICs and MFCs of encapsulated have been determined.Solely the GA encapsulated had its anti-biofilm and in vivo action verified.Cytotoxicity of free and encapsulated GA and FE were determined. TheMIC ranged from 5,0 to 0,625 mg/ml for GA and 2,5 and 0,019 mg/ml forFE. MFCs values were not found. All phenolics molecules were found inFE by ESI/MS. AG and FE had a direct effect on virulence factors of C.albicans, except on the secretion of exoenzymes. There was no differencein the CIM between free and encapsulated substances. The anti-biofilm effect was better in GA encapsuladed than its free form. A clinical improvement of sugestives erythematous lesions on the palate of rats was observed, although the hyphaes were not found in the palatar mucosa.The cytotoxicity for all substances was moderated. After the analysis, weobserved the anti-C. albicans effect of GA and FE. AG encapsulated showed promising anti-biofilm effect and apparent clinical improvement inlesions suggestive of erythematous candidiasis in palatar mucosa of rats

Atividade da fração enriquecida em fenólicos de Buchenavia tomentosa e de algumas substâncias isoladas antes e após encapsulação com beta-ciclodextrina em Candida albicans / Activity of phenolic enriched fraction of Buchenavia tomentosa and some isolated compounds before and after encapsulation with beta-cyclodextrin in Candida albicans

O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade frente a Candida albicans da fração enriquecida em fenólicos (FE) das folhas de Buchenavia tomentosa além das substâncias ácido gálico (AG), corilagina, kaempferol e vitexina, substâncias fenólicas que foram previamente detectadas no extrato aquoso de B. tomentosa livres ou encapsuladas em ciclodextrinas. Para tal, foi realizado teste de micro diluição com cepas padrão e isolados clínicos e análise química da FE por espectrometria de massa (ESI-MS).Detectou-se que o extrato acetônico foi a FE e AG foi a substância fenólica mais eficiente contra C. albicans. O efeito de FE e AG contra os fatores de virulência de C. albicans foram analisados. FE e AG foram encapsulados em 2-hidroxipropil-beta-ciclodextrina e tiveram sua análise química realizada. As CIMs e CFMs dos encapsulados foram determinadas, porém apenas o AG encapsulado teve sua ação antibiofilme e in vivo verificadas. A citotoxicidade de AG e FE livres e encapsulados foi determinada. As CIMs variaram de 5,0 e 0,625 mg/mlpara o ácido gálico e 2,5 e 0,019 mg/ml para FE. AG e as outras moléculas foram encontradas na FE. Não foram encontrados CFMs. Os fenólicos estudados também foram encontrados em FE por ESI/MS. Tanto FE quanto AG tiveram efeito direto nos fatores de virulência de C. albicans, exceto sobre a secreção de exoenzimas. Não houve diferença na CIM entre as substâncias livres e encapsuladas. AG encapsulado teve melhor ação anti-biofilme do sua forma livre. Foi verificada melhora clínica de lesões eritematosas no palato de ratos, porém não foi possível. A citotoxicidade das substâncias livres ou encapsuladas variou de moderava a leve para FE e foi moderada para AG. Após as análises, observou-se o efeito anti-C. albicans de FE e AG. AG encapsulado apresentou promissor efeito anti-biofilme e aparente melhora clínica nas lesões sugestivas de candidose eritematosa na mucosa palatar dos ratos.

The aim of this study was to evaluate the effectiveness against Candida albicans of fraction enriched in phenolic (FE) of Buchenavia leavestomentosa beyond substances gallic acid (GA), corilagin, kaempferol andvitexin, phenolic substances previously detected in the aqueous extract ofB. tomentosa, free or encapsulated in cyclodextrins. Microdilution test with standard strains and clinical isolates besides the chemical analysis of FEby mass spectrometry (ESI-MS) were carried out. The acetone extract was the FE and AG was the most efficient phenolic substance against C.albicans. The effect of FE and AG against the virulence factors of C.albicans was also analyzed. FE and AG were encapsulated into 2-hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HP-β-CD) and had their chemical analyses made. MICs and MFCs of encapsulated have been determined.Solely the GA encapsulated had its anti-biofilm and in vivo action verified.Cytotoxicity of free and encapsulated GA and FE were determined. TheMIC ranged from 5,0 to 0,625 mg/ml for GA and 2,5 and 0,019 mg/ml forFE. MFCs values were not found. All phenolics molecules were found inFE by ESI/MS. AG and FE had a direct effect on virulence factors of C.albicans, except on the secretion of exoenzymes. There was no differencein the CIM between free and encapsulated substances. The anti-biofilm effect was better in GA encapsuladed than its free form. A clinical improvement of sugestives erythematous lesions on the palate of rats was observed, although the hyphaes were not found in the palatar mucosa.The cytotoxicity for all substances was moderated. After the analysis, weobserved the anti-C. albicans effect of GA and FE. AG encapsulated showed promising anti-biofilm effect and apparent clinical improvement inlesions suggestive of erythematous candidiasis in palatar mucosa of rats.